刺客信條II/角色
艾吉奧·奧迪托雷·達·佛羅倫斯
- 主條目：艾吉奧·奧迪托雷·達·佛羅倫斯
艾吉奧·奧迪托雷又譯埃齊歐（Ezio Auditore）意思為佛羅倫斯之鷹，他生於文藝復興時期的義大利佛羅倫斯，艾吉奧17歲左右時，家庭遭受了重大變故，其父被人出賣，父親、哥哥和弟弟被抓走，碰巧出門在外的艾吉奧躲過了一劫。他前往囚禁父兄的塔樓，得到父親的命令，繼承了父親刺客的事業。在眼睜睜看著父兄被處以絞刑後，他在家族好友萊昂納多·達·文西(Leonardo Da Vinci)以及妓院老闆葆拉幫助下，將母親和妹妹轉移到了叔叔馬里奧所在的蒙特里久尼莊園。從此，他不再是高傲輕浮自大玩世不恭的少年。此後，他先後遇見了「狡狐」拉·博爾佩、傭兵頭領巴托洛廖·德·阿爾維亞諾、女賊羅莎、威尼斯盜賊首領安東尼奧、弗利城主卡特琳娜·斯福札等人，艾吉奧逐漸蛻變為成熟堅毅的刺客，勇敢地踏上了與聖殿騎士戰鬥，奪取伊甸聖器的艱險路途，一個一個地手刃了仇人。
到《刺客信條Ⅱ》的故事結束時，艾吉奧已經成為一個身經百戰的中年刺客，刺客組織的真正領袖。他歷盡艱險得到了伊甸聖器「金蘋果」和「權杖」，目睹了人類存在的真相。他在結局處放走了頭號敵人，羅馬教皇羅德里格·波吉亞，為續作《刺客信條：兄弟會》留下伏筆。
露西·斯蒂爾曼
表面上和她的上司vidic都同屬聖殿騎士（Templar）的機構——名為Abstergo的實驗室，實際上她和主角一樣也是一名刺客。她是個溫柔的女人，曾經被3個持槍的男人綁架，毆打，逼供，Warren Vidic 救了她，所以雖然她認為教授對她很兇，而且不是好人，但她仍然感激教授的救命之恩，當然，感激並不代表她不會試圖破壞教授的計畫，事實上她從一開始就在努力破壞教授的計畫。
戴斯蒙德·邁爾斯
一名調酒師，Altair的直系後代，實際是刺客組織的一員，從小被養父母軟禁，因為受不了刺客組織封閉的生活而逃走，當了一名調酒師，沒怎麼見過世面，朋友也沒幾個，但最後還是被聖堂所發現，並抓到Abstergo進行記憶回溯實驗。每天早上進虛擬機提取祖先的記憶，晚上偷看郵件和露西聊天。後來得到祖先的鷹眼能力，並且與露西一起逃脫。二人為了阻止聖堂的陰謀，回到現代刺客組織繼續尋找祖先的記憶，從而開始了本作的故事。
馬里奧·奧迪托雷
- 主條目：馬里奧·奧迪托雷
義大利人。1454年至1500年間托斯卡納的蒙特利久尼城的掌控者。他同時還擔任義大利刺客的領導者，直到被殺害。
萊昂納多·達·文西
- 主條目：萊昂納多·達·文西(刺客信條)
一個博學的義大利人：解剖學家，雕塑家，製圖員，畫家，植物學家，工程師，建築師，數學家，音樂家，科學家，發明家，地質學家，生物學家和作家。李奧納多被稱為文藝復興時期人們的典範——十分好奇且極具想像力。他被全世界的學者，工程師和藝術家廣泛認為是有史以來最偉大的思想家，同時也是最多才多藝的人。
萊昂納多在刺客與聖殿騎士之間的鬥爭中扮演了一個重要的角色，這在他有生之年中傳遍了他的家鄉，並始終與佛羅倫斯的艾吉奧·奧迪托雷保持著親密朋友與盟友的關係。
羅德里格·波吉亞
原名Roderic Llançol，也曾叫Roderic de Borja i Borja，是西班牙紅衣主教，也是聖殿騎士的首領。他是胡安·波吉亞， 切薩雷·波吉亞， 盧克雷齊婭·波吉亞和傑弗里·波吉亞的父親，喬瓦尼·波吉亞的祖父。
他於1492年至1503年擔任教皇，被稱作亞歷山大六世。他是文藝復興時期最富爭論性的教皇之一，他的家族也成為了那個時期教廷腐敗的代名詞。
喬瓦尼·奧迪托雷
- 主條目：喬瓦尼·奧迪托雷
一名佛羅倫斯貴族，奧迪托雷家族 的族長。表面上他是為美弟奇家族服務的一名銀行家，但只有少數人知道，他事實上是一名刺客組織成員。他與他的兄弟馬里奧·奧迪托雷自出生起就撫養並訓練為刺客，很早就知道了聖殿騎士的存在。
喬瓦尼還是瑪利亞 奧迪托雷 的丈夫，以及費代里科，艾吉奧，克勞迪婭和彼得魯喬的父親。他試圖引導自己的孩子們加入組織，但直到他被害時，他只向他的妻子透露過自己的真實信仰。雖然他已經開始對自己長子進行刺客式的訓練，但採用的是相對隱匿的方式。
瑪麗亞·奧迪托雷
喬瓦尼 ·奧迪托雷的妻子——喬瓦尼是一個佛羅倫斯銀行家，也是一名刺客。她是四個孩子的母親——費代里科，艾吉奧，克勞迪婭和彼得魯喬——也是馬里奧·奧迪托雷的弟媳。
瑪麗亞出生於莫齊家族——一個名門望族，但她年少時卻喜歡和「真正的市民」混在一起，這也使她遇到了他後來的丈夫。嫁入奧迪托雷家族後，她仍然和下層百姓相處的很好，也和達文西時常有來往。
保拉
佛羅倫斯妓女的領袖，馨香玫瑰 妓院的老闆，刺客公會的成員。她早年父母雙亡，生活困苦，直至她被控謀殺一名城市衛兵。在喬瓦尼 奧迪托雷的幫助下，保拉擺脫了指控， 隨後創建了妓院。她好幾次幫助了年輕時的 艾吉奧，教會艾吉奧如何降低、消除惡名。她也恢復了與萊昂納多 達 芬奇的聯繫，萊昂納多修復了艾吉奧的袖劍。幾年後，她參加了在威尼斯關於從羅德里格 波吉亞奪取伊甸蘋果的行動，連同一些刺客幫助了艾吉奧。她在虛榮篝火行動中擔任重要角色，在那裡她和拉 沃爾佩（La Volpe）發動市民反抗吉羅拉莫 薩沃納羅拉（Girolamo Savonarola）的統治,解放這座城市。
克勞迪婭·奧迪托雷
文藝復興時期的佛羅倫斯貴族，是刺客組織的成員。她是艾吉奧，義大利刺客導師的妹妹。
在1476年，克勞迪婭成為她叔叔領導下的蒙特利久尼城的財務會計。這座城在克勞迪婭的管理和從重開的商店、組織賺來的錢下變得繁榮起來。
在1500年1月，蒙特利久尼被在切薩雷·波吉亞指揮下的波吉亞軍圍攻並被大面積破壞，使得奧迪托雷家族無家可歸。有違她哥哥讓克勞迪婭和母親去故鄉佛羅倫斯的期望，克勞迪婭和母親瑪麗亞 跟隨艾吉奧到了羅馬。在那裡，她成為了盛開薔薇 ——羅馬最有名妓院的老闆娘。
最終，在證明了她對她哥哥來說是一個有價值的戰士之後，艾吉奧讓克勞迪婭加入刺客組織 。第二年，克勞迪婭被波吉亞頑固分子俘獲。後來他被艾吉奧和馬基雅維利救出。在這段時間她辭去了盛開薔薇老闆娘的職務，和她的朋友保拉呆在佛羅倫斯休養直到1507年。
克勞迪婭在1510年，當他哥哥啟程去中東旅行，尋找傳說中據說在馬斯亞夫的阿泰爾 的圖書館時，被授予義大利刺客 的臨時控制權直到她哥哥在1512年晚些時候回來。之後艾吉奧退出刺客組織並指派了一名繼承者。
烏貝托·阿爾貝蒂
儘管他的法律知識完全是自學成才，但他大部分的訴訟都是成功的，之後他還成為佛羅倫斯的正義旗手。在他還是一名律師的時候，美第奇銀行驅逐了他的家人，使得他心中有了對美第奇家族復仇的渴望。為此他接觸了神秘的聖殿騎士，他們許諾能給他所想來換取他的合作。烏貝托同意合作，在他當選進入政界後便開始與美第奇家族建立聯繫， 來取得洛倫佐·德·美第奇的信任。而且烏貝托和喬瓦尼·奧迪托雷是密友。烏貝托在某些問題上為喬瓦尼和洛倫佐出謀獻策，他負責解碼由喬瓦尼在威尼斯截下的信件，不過在安東尼奧·馬費伊破譯之後，烏貝托將部分和聖殿騎士有關的內容瞞下。他在聖殿騎士最高大師羅德里格·波吉亞的命令下，親自授權逮捕喬瓦尼和他的家人並處決他們，來換取保他家經濟利益的承諾。他矢口否認收到過任何證明奧迪托雷家族無罪的證明。最後他被艾吉奧抓住機會在藝術展覽會上暗殺。
安東尼奧·馬費伊
26歲時，馬費伊在見證佛羅倫斯傭兵對沃爾泰拉的劫掠後加入聖殿騎士團。馬費伊斥責了洛倫佐，並與聖殿騎士為伍尋求報復。烏貝托負責解碼由喬瓦尼在威尼斯截下的信件，不過在安東尼奧·馬費伊破譯之後，烏貝托將部分和聖殿騎士有關的內容瞞下。之後還帶兵前往奧迪托雷公館去搜尋喬瓦尼，可是喬瓦尼在此之前先逃脫了。之後和其他聖殿騎士的同僚參與暗殺洛倫佐·德·美第奇的行動，結果洛倫佐被艾吉奧解救，行動失敗。最後被艾吉奧刺殺於聖吉米尼亞諾的一處高塔上。
斯特凡諾·達·巴尼奧內
1418年出生在巴尼奧內鎮，並成為一名修士，還加入了聖殿騎士組織，並在羅馬被訓練成為一名拷問者。他也是雅各布·德·帕齊的顧問。之後和其他聖殿騎士的同僚參與暗殺洛倫佐·德·美第奇的行動，結果洛倫佐被艾吉奧解救，行動失敗。最後艾吉奧在蒙特奧利韋托大修道院利用鷹眼視覺定位巴尼奧內將他刺殺。
貝爾納多·巴龍切利
由於侄子們被美第奇家族放逐而對其心生恨意。在其雇主雅各布·德·帕齊的引導下，他成為了帕齊家族的一名銀行家，也成為了聖殿騎士的一員。之後和其他聖殿騎士的同僚參與暗殺洛倫佐·德·美第奇的行動，負責為其他的同夥提供武器，結果洛倫佐被艾吉奧解救，行動失敗。貝爾納多則迅速逃離，一度逃到了君士坦丁堡，但還是被抓了回來。而貝爾納多很快就逃離抓住他的人，一直逃到了聖吉米尼亞諾。本地的僱傭兵與艾吉奧·奧迪托雷的盟友根本找不到他。最後被艾吉奧利用鷹眼視覺定位並刺殺。
弗朗切斯科·薩爾維亞蒂
弗朗切斯科深信他能夠成為佛羅倫斯下一任大主教，當洛倫佐·德·美第奇擋住了他的去路後，弗朗切斯科將滿腔怒火發泄到美第奇家族上，發誓報仇。聖殿騎士對他的事業給予了扶持。弗朗切斯科通過與教皇西克斯特四世的家族裙帶關係變得非常富有。他與帕齊家族密謀侵入佛羅倫斯。之後和其他聖殿騎士的同僚參與暗殺洛倫佐·德·美第奇的行動，負責在城外進攻吸引美第奇家族的衛兵，結果洛倫佐被艾吉奧解救，行動失敗。之後他跑到了義大利的鄉村地區。他和一名農夫互換了衣服，逃到了托斯卡納鄉間深處的別墅里。艾吉奧追蹤到他，讓叔叔馬里奧·奧迪托雷指揮的僱傭兵們進入了別墅與弗朗切斯科的衛兵戰鬥，艾吉奧自己則是悄無聲息的刺殺了弗朗切斯科。
卡洛·格里馬爾迪
他從小渴望獲得權力。他很幸運地認識了威尼斯總督喬凡尼·莫塞尼戈，並努力增進與他的關係。當他離開摩納哥的宮殿後，他發現威尼斯政治家伊尼亞齊奧·孔塔里尼女兒的秘密，她想違背父親的願望，與僕人的兒子私奔。最後卡洛·格里馬爾迪阻止這對情侶的計畫，因而得到了伊尼亞齊奧的信賴。在埃米利奧·巴爾巴里戈被艾吉奧刺殺之後，卡洛前去會見了馬可·巴爾巴里戈、西爾維奧·巴爾巴里戈、但丁·莫羅以及最高大師羅德里格·波吉亞，他們討論殺死現任總督的必要性以及從他們當中選出誰來繼任的問題。羅德里格到達後不久就斥責下屬的自私，因為選擇下一任總督是教團的選擇。格里馬爾迪確定無法將總督招募進聖殿的事業之後，他安排了一次與總督在總督府的會面，而在這當中卡洛就在莫塞尼戈的酒中下了毒以殺死總督。最後艾吉奧乘坐達文西製作的飛行器進入絲綢宮刺殺了卡洛。
但丁·莫羅
但丁是克里斯托福羅·莫羅總督的獨生子，出身貴族。年輕時成為威尼斯衛兵隊長，也是莫羅家族的唯一繼承人。在25歲的時候，但丁和卡洛塔成婚，而他擔任衛兵隊長期間和馬克·巴爾巴里戈也是親近的朋友。然而馬可·巴爾巴里戈想將但丁的妻子卡洛塔據為己有，組織了對但丁的謀殺。但丁最後僥倖逃脫，但是腦組織被嚴重破壞。馬可哄騙但丁將自己的妻子休掉，還成功地說服但丁成為自己的私人保鏢。作為合格的保鏢，但丁兩次救下了馬可·巴爾巴里戈。在狂歡節期間，但丁和艾吉奧搏鬥來決定黃金面具——接近馬可·巴爾巴里戈的絕佳機會——的去向，雖然艾吉奧獲得勝利，但是受賄的裁判卻判定但丁獲勝，可是艾吉奧還是偷到了但丁的黃金面具，並藉此機會刺殺了馬可。馬可死後，西爾維奧重新僱傭但丁成為自己的保鏢，但丁幫助他的新主人占領了威尼斯軍械庫。然而傭兵領袖巴爾托洛梅奧·德·阿爾維阿諾聯合艾吉奧奪回了威尼斯軍械庫，而艾吉奧也將但丁和西爾維奧雙雙刺殺於碼頭。臨死之前，但丁向艾吉奧透露聖殿騎士打算前往賽普勒斯。
奧爾西兄弟
- 盧多維科·奧爾西
- 凱科·奧爾西
卡特琳娜·斯福爾扎在發現丈夫吉羅拉莫·利拉奧是一名聖殿騎士之後，僱傭奧爾西兄弟殺死了他。利拉奧在吃飯的時候被奧爾西兄弟所殺。之後，羅德里格僱傭他們去殺死卡特里娜並取回利拉奧記載手札頁面的地圖，並偷取被艾吉奧在威尼斯奪走的神器伊甸蘋果。奧爾西兄弟同意了他的請求，並帶兵圍攻弗利城。在戰鬥過程中，他們抓住了卡特琳娜的兩個孩子做威脅。於此，凱科離開了盧多維科，留下盧多維科在燈塔頂部看管俘虜。艾吉奧救出碧昂卡後，爬上了燈塔頂，殺死了盧多維科，並迅速釋放了男孩。凱科·奧爾西襲擊了拉瓦迪諾堡壘。卡特琳娜·斯福爾扎和尼可羅·馬基亞維利的抵抗沒能保住伊甸蘋果，凱科順利地奪走了蘋果。隨後凱科為了將蘋果交給羅德里格而試圖逃離弗利，但艾吉奧找到了他，在他逃走之前將他刺殺，奪回了蘋果。但是，在臨死之前，凱科用刀刺在了艾吉奧的右腹部，使艾吉奧身受重傷。蘋果也被吉羅拉莫·薩沃納羅拉奪走。
吉羅拉莫·薩沃納羅拉
薩沃納羅拉出生於費拉拉城。從小他就反對義大利文藝復興時期出現的牧師腐敗現象。1475年，薩沃納羅拉在聖神大殿求學，成為了一名道明會修士。1482年，他前往佛羅倫斯進行公共演說，但是沒什麼成色。1487年，薩沃納羅拉離開了佛羅倫斯，前往博洛尼亞。1488年，薩沃納羅拉在弗利城居住了一段時間。這時，他在路過正與卡特琳娜·斯福爾扎對話的奧爾西兄弟身邊時，聽到了關於伊甸蘋果的消息。他偷聽了他們的對話，從那時起，他就一直密切關注著奧爾西兄弟。最後在奪回蘋果的艾吉奧失去意識之前，薩沃納羅拉出現在他身邊，從他手中取走了伊甸蘋果。1494年，隨著法國國王查理八世將美第奇家族從佛羅倫斯驅逐之後，薩沃納羅拉利用偷來的伊甸蘋果接管了佛羅倫斯。在統一佛羅倫斯之後，出於想要將佛羅倫斯帶回到中世紀的欲望，他著手毀掉所有文藝復興時期的藝術品與書籍。成為教皇的羅德里格發現薩沃納羅拉持有伊甸蘋果之後，他派出了幾支教皇軍部隊前去奪取蘋果，但都大敗而歸。與此同時，艾吉奧·奧迪托雷於1497年回到了佛羅倫斯，和尼可羅·馬基雅維利合作，一同推翻了薩沃納羅拉的統治，奪回伊甸蘋果。最後他被火刑處置時，艾吉奧殺死了這個可憐的僧侶。
洛倫佐·德·美第奇
文藝復興時期的義大利政治家，佛羅倫斯共和國的實際控制著。馬基雅維利在所著的《佛羅倫斯史》副標題中稱他為「偉大的洛倫佐」（il Magnifico ，英文為the Magnificent），這是當時佛羅倫斯人為他起的稱號。他是外交家，政治家，以及詩人、學者和藝術家的贊助人及保護人。
他的一生貫穿了義大利文藝復興的高潮時期，他的死標誌著佛羅倫斯黃金時代的結束。他努力維繫的義大利各城邦之間的累卵般的和平局面，在他死後迅速破裂。死後，他被安葬在佛羅倫斯的美第奇教堂，葬於他的兄弟，朱利安諾的旁邊。
洛倫佐是刺客組織的秘密盟友，尤其與奧迪托雷家族關係緊密。他與喬萬尼奧迪托雷緊密合作以對抗波齊亞 家族。喬萬尼死後，他被喬萬尼的次子艾吉奧從「帕奇陰謀團隊」策劃的襲擊中救下，這導致了二人之後的長時間合作。艾吉奧在弗利，托斯卡納和威尼斯等地為他執行了許多暗殺委託 。
巴爾托洛梅奧·德·阿爾維阿諾
刺客組織的一員，亦是威尼斯和羅馬僱傭兵首領。作為一名訓練有素、忠心不二的鬥士並統有數量可觀的僱傭兵，巴爾托洛梅奧對刺客組織而言是一位寶貴的人才。
他在威尼斯的時候與艾吉奧·奧迪托雷（後成為義大利刺客導師）結交，二人協力從西爾維奧·巴爾巴里戈手中奪回了巴爾托洛梅奧的故鄉——城堡區。西爾維奧這名聖殿貴族一度對這片土地主張權利。巴爾托洛梅奧參加了艾吉奧正式加入刺客組織的儀式；他還在艾吉奧潛入梵蒂岡時助其一臂之力，使衛兵忙於應付他在羅馬城製造的事故而無暇阻止艾吉奧。
巴爾托洛梅奧與艾吉奧再次在羅馬會面時，他與妻子潘塔西利婭·巴廖尼已經駐進了阿爾維阿諾營地。巴爾托洛梅奧在這裡對抗波吉亞軍隊和奧克塔維安·德·瓦盧瓦率領的法國士兵。他與艾吉奧並肩戰鬥，成功削弱了波吉亞勢力，使刺客得以解放這座城市。
巴爾托洛梅奧同樣在若干只義大利軍隊服役，因其果敢的性格和精湛的劍術而名聲遠播。他在阿尼亞德洛之戰中失利。被釋放後他繼續自己的軍事生涯，直至在圍攻赫迪（Ghedi）時遭遇最後的敗績。
安東尼奧·德·馬吉亞尼斯
安東尼奧在1443年生於一個窮困的家庭。他在跟著父親當學徒時自學自寫。由於他的社會地位，安東尼奧被帕多瓦大學拒絕接受。其他幾所義大利的學校提交的申請也均被拒絕。失望痛苦的他轉而投身盜竊。1469年左右，他搶劫了帕多瓦大學校長的財產，並成功從獄中逃脫。最終，安東尼奧加入了刺客組織，隨後成立了當地的盜賊公會。安東尼奧和盜賊同伴們基本只從那些威尼斯不良貴族手中盜取財產。1475年，一名叫做羅莎的女孩試圖扒竊安東尼奧，但他沒有將其交給衛兵，而是將她留下來作為學生培養。
1481年，他見到了艾吉奧·奧迪托雷·達·佛羅倫斯，兩人共同挫敗了聖殿騎士企圖接手威尼斯的計畫。在盜賊們潛入塞塔宮失敗後，艾吉奧最終成功刺殺了埃米利奧·巴爾巴里戈。盜賊們之後將塞塔宮據為己有並轉變成新的行動基地。之後艾吉奧發現聖殿騎士企圖殺害喬凡尼·莫塞尼戈總督，並請求安東尼奧的協助。偵查總督府後，艾吉奧和安東尼奧趕往萊昂納多·達·文西的工作室，請求使用飛行器。安東尼奧命令盜賊們在威尼斯各處點起火堆，讓艾吉奧能夠使用加熱的空氣提升飛行器的高度。艾吉奧躲過弓箭手射出的箭矢，降落在了總督府屋頂並成功刺殺了卡洛·格里馬爾迪。在接下來幾年中，他再一次幫助了艾吉奧打倒威尼斯的高階聖殿，向艾吉奧介紹修女泰奧多拉，同時策劃刺殺聖殿總督馬可·巴爾巴里戈，並在之後向艾吉奧介紹繼任總督阿戈斯蒂諾·巴爾巴里戈。最後指示他去找僱傭兵巴爾托洛梅奧·德·阿爾維阿諾去獲得打倒西爾維奧·巴爾巴里戈的支持。
1499年，安東尼奧在蒙特里久尼與其他刺客會面，他們制定計畫阻止羅德里格進入密室。艾吉奧使用蘋果的能力在隱藏在手札下的地圖中亮出了密室的位置。當他們發現其位於羅馬後，其他刺客們同意在城市中製造干擾，為艾吉奧潛入西斯廷禮拜堂殺死羅德里格提供機會。1504年，克勞迪婭·奧迪托雷辭去了羅馬千紅玫瑰鴇母的職務，佛羅倫斯盜賊公會的刺客拉·沃爾佩與安東尼奧商量之後，派羅莎去運營那個妓院。
雅各布·德·帕齊
一名富裕的佛羅倫斯貴族，聖殿騎士組織一員。作為帕齊家族這個貴族家族的成員，雅各布扮演著領導者的角色，負責管理帕奇的銀行事務。他還是維耶里和維奧拉·德·帕齊的伯父，弗朗切斯科·德·帕齊的叔父。
雅各布是洛倫佐·德·美第奇的助理。為了對抗佛羅倫斯的當權者。他在1478年，連同四名聖殿騎士，策劃了一場試圖刺殺美第奇的陰謀。
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埃米利奧·巴爾巴里戈
一個威尼斯商人和威尼斯的僭主，聖殿騎士團的成員，在威尼斯盜賊工會的幫助下，艾吉奧·奧迪托雷潛入了絲綢宮，將埃米利奧·巴爾巴里戈刺殺。
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肖恩·黑斯廷斯
刺客組織成員，負責為遍布全球的眾多刺客小組提供技術支持，並且與組織上級取得聯繫以了解其他小組的動向，特別是在外行動人員的情況。
在他的小隊中，肖恩是史學家兼分析員，他組建了阿尼穆斯內的資料庫，包括人物、地點、事件的資料，以協助戴斯蒙德·邁爾斯完成Animus進程。
麗貝卡·克瑞恩
刺客組織成員，也是Animus2.0的創造者。她與戴斯蒙德·邁爾斯，露西·斯提爾曼和肖恩·黑斯廷斯一樣同屬當代刺客。她的主要工作是和她的搭檔肖恩一起，為其他刺客們提供技術支持，並維護Animus2.0。
克萊·卡茨馬雷克
實驗體16號，是21世紀早期的一名刺客組織成員。克萊生於一個工程師家庭，由於生活中不斷發展的混亂和他父親疏忽的態度，克萊曾面臨一些精神問題。因此，他在尋求認同的過程中加入了刺客組織。
作為一名刺客組織成員，克萊最重要的任務是作為一名阿尼穆斯項目的實驗者潛入阿布斯泰戈工業公司，以便獲取更多與阿尼穆斯相關的信息。他被標記為實驗體16號，克萊被迫通過他的基因記憶重新體驗了他祖先的記憶。當卡萊發現他的隊友露西·斯蒂爾曼——她在多年前已經潛入了阿布斯泰戈，並受命幫助克萊安全脫離阿布斯泰戈——已經放棄了他們的目標，並且加入了他們的敵人聖殿騎士，克萊不得不在阿尼穆斯中成天、成小時的體驗記憶會話。由於這使得他的意志無法將他自己的人格從他祖先的人格中分離出來，克萊的精神變得不穩定，直到他最終自殺。
在他所謂的自殺之後，克萊繼續以阿尼穆斯中的一個人工智慧的形式苟延殘喘，這個人工智慧正是以他的人格創造的。也正因此，他能夠從內部操縱阿尼穆斯的許多程序，從而幫助他在阿尼穆斯項目中的繼任者戴斯蒙德·邁爾斯。
西爾維奧·巴爾巴里戈
是威尼斯的一名政府官員，聖殿騎士組織成員。他還是馬可·巴爾巴里戈的表弟，埃米利奧·巴爾巴里戈的親戚。
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馬可·巴爾巴里戈
一名聖殿騎士組織的成員，在1486年成為威尼斯的總督。
馬可來自一個有錢有勢的貴族家族，他以自己的方式成為了一名僭主。他是阿戈斯蒂諾·巴爾巴里戈的兄弟，聖殿騎士同僚西爾維奧和埃米利奧·巴爾巴里戈的表弟。
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拉·沃爾佩
La Volpe（拉·沃爾佩）（義大利語的狐狸）是15世紀末佛羅倫斯和羅馬盜賊工會的領袖，也是刺客組織的一員。
維耶里·德·帕齊
聖殿騎士團的成員和富裕的佛羅倫斯貴族，是帕齊家族最年輕的成員。他是弗朗切斯科·德·帕齊的兒子，維奧拉·德·帕齊 的兄弟，雅各布·德·帕齊 的侄孫。
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弗朗切斯科·德·帕齊
聖殿騎士組織的成員而且是一個富有的佛羅倫斯貴族及銀行家。
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密涅瓦
Menrva或Mera，是第一文明先行者的成員之一。
泰奧多拉
泰奧多拉出生在威尼斯珠寶商家庭中，並在母親手下當學徒，擔任店員。來到店裡的人注意到泰奧多拉的美貌和魅力，1467年11月26日，根據司法記錄，17歲的她與一名已婚男子被捉姦在床。為了避免官司，泰奧多拉的父母將她送到了聖瑪利亞德吉利天使修道院作為懲罰。1473年，厭倦了修道院生活的泰奧多拉也厭倦了其與自己信仰的衝突。她離開了修道院。同年，泰奧多拉在威尼斯的節慶中心多爾索杜羅區開辦了一家叫做玫瑰之貞的尋歡所。裡面的人都是和泰奧多拉有著相似理想的前修女。教皇經常試圖強迫威尼斯議會關掉它，但它一直經營到1516年。在這段時間裡，她也加入了刺客組織。
1486年，她協助刺客艾吉奧·奧迪托雷進行刺殺聖殿騎士威尼斯總督馬可·巴爾巴里戈的任務。艾吉奧在泰奧多拉和姑娘們的幫助下，潛入了總督的狂歡節派對，並刺殺了目標。1488年，泰奧多拉和其他刺客一起在威尼斯從聖殿騎士手中獲得金蘋果，並參加了艾吉奧加入刺客組織的儀式。1499年，艾吉奧獲得了剩餘的手札頁面，並再次與泰奧多拉和其他刺客們在蒙特里久尼召開會議。他們確定了金蘋果就在梵蒂岡。她協助艾吉奧潛入梵蒂岡。在這之後，她回到了威尼斯，仍是交際花的首領。
1512年，克勞迪婭·奧迪托雷提及泰奧多拉還活著並且還是刺客的領導之一。她也在艾吉奧退休後參與推選了盧多維科·阿里奧斯托為導師。1516年，玫瑰之貞被一個主教放火燒了。泰奧多拉下落不明。
卡特琳娜·斯福爾扎
弗利和伊莫拉的女領主，米蘭公爵加萊阿佐·瑪利亞·斯福爾扎的女兒。她在10歲時就和教皇的侄子吉羅拉莫·里亞里奧訂婚了，並在14歲時成婚。
尼可羅·馬基雅維利
一個義大利哲學家和作者，也是刺客組織的一員。作為現代政治科學的先驅之一，他同時是一個出色的外交官、政治哲學家、音樂家和戲劇家，但是最重要的是，他是佛羅倫斯共和國的公務員。
他最著名的作品是君主論，在書中他論述了如何運用計謀來獲得政治力量，創建了所謂的『馬基雅維利主義』。
但丁·阿利吉耶里
但丁一生都隸屬於刺客組織。
在13世紀後期，但丁受任去訓練一名刺客同伴的兒子——多梅尼科·奧迪托雷，日後奧迪托雷家族的創建者。多梅尼科第一次知曉兄弟會的時候，他的父親，他父親的贊助人馬可·波羅以及但丁都在場。馬可·波羅也讓他們用訂單的方式來讓但丁對他進行訓練，作為交換，則是要多梅尼科載他前往西班牙。但丁在離開威尼斯之前和多梅尼科多次會面，他們的討論開始逐漸超越物質層面，開始講述像是生命、愛、榮耀與正義之類的事物。之後但丁向多梅尼科展示了傳說刺客阿泰爾·伊本-拉阿哈德的手札，並教導他信條。通過這些教導，多梅尼科獲益匪淺。
在前往巴塞隆納的旅途動身之前，但丁就在拉文納被聖殿騎士們謀殺了。
克里斯蒂娜·韋斯普奇
一個知名的佛羅倫斯美女，也是畫家們青睞的對象，特別是 桑德羅·波提切利 ——他的好幾幅畫都是用她做模特的。
沃倫·韋迪克
一名受僱傭於Abstergo的科學家。他是Abstergo研究部門的主管，同時也管理著Animus項目。他負責為Animus計畫尋找實驗體，並用他們的記憶獲得關於伊甸碎片和刺客組織的信息。
作為Abstergo的雇員，沃倫也是一名高級聖殿騎士，內殿團的一員。